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  • 中国进出口商品检验标准
中国进出口商品检验标准

1 主题内容与适用范围
  本标准规定了用 4-甲基伞形酮辛酯试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。
  本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验,其他食品可参照使用。
2 引用标准
  SN 0170 出口食品中沙门氏菌(包括亚利桑那菌)检验方法
3 符号
  MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4-甲基伞形酮辛酯)的缩写。
  MUCAP:试剂:用 4-甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。
  SS琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。
  HE琼脂:Hektoen Enteric 琼脂培养基。
4 设备与材料
4.1 紫外光灯:波长 366 nm,功率≥6W。
4.2 放大镜:3~4X。
4.3 毛细滴管。
5 培养基与试剂
培养基与试剂按 SN 0170 第5章,另补充以下部分:
5.1 SS琼脂培养基(含1%蔗糖):见附录 A1。
5.2 HE琼脂培养基:见附录 A2。
5.3 MUCAP试剂:见附录 A3。
5.4 氧化酶试纸:见附录 A4。
6 样品制备及增菌培养
参照SN 0170进行。
7 分离培养
7.1 将增菌培养液摇匀,挑取一接种环,划线接种于 SS和 HE琼脂培养基各一个,于 36
±1℃培养 24±2h。
7.2 观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落,应再继续培养24±2h。
沙门氏菌的菌落特征见表 1。
表 1 沙门氏菌属菌落特征
──────────────────────────────────────
菌 落 特 征
──────────────────┬───────────────────
SS平板 │ HE平板
──────────────────┼───────────────────
圆形,边缘整齐;淡黄色,半透明,有或无│圆形,边缘整齐;蓝绿色至蓝色,有或无黑
黑色中心;周围培养基透明淡黄色 │色中心;周围培养基透明墨绿色
──────────────────┴───────────────────
8 测定
8.1 从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落),
用玻璃笔做好标记并编号。
8.2 用毛细滴管吸取 MUCAP试剂,加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部
滴加试剂后,将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为 MUCAP试验阳性,将阳
性菌落号记录下来。
8.3 用接种环挑取荧光反应阳性菌落,涂于氧化酶试纸上,观察涂菌点是否变蓝色。于
10min内变蓝色为氧化酶试验阳性;不变色为阴性。
9 结果的报告
9.1 MUCAP试验阴性的样品,报告为“未检出沙门氏菌”
9.2 MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品,按SN 0170第四章继续进行生化和血清学试
验,并根据试验结果报告。
附 录 A 
培养基和试剂
(补充件)
A1 SS琼脂培养基(含1%蔗糖)
牛肉浸膏 5.0g
蛋白胨 5.0g
乳糖 10.0g
蔗糖 10.0g
胆盐No.3 8.5g
柠檬酸钠 8.5g
硫代硫酸钠 1.0g
柠檬酸亚铁 1.0g
煌绿 1.0g
中性红 0.025g
琼脂 13.5g
蒸馏水 1 000ml
将各成分溶于水,煮沸4~5min。最终pH7.0±0.2。冷至55~66°C,倾注平板。
A2 HE琼脂培养基
(月示)蛋白胨 12.0g
酵母浸出物 3.0g
乳糖 12.0g
蔗糖 12.0g
水杨素 2.0g
混合胆盐 9.0g
氯化钠 5.0g
硫代硫酸钠 5.0g
柠檬酸铁铵 1.5g
溴麝香草酚蓝 0.065g
酸性复红 0.1g
琼脂 14.0g
蒸馏水 1000mL
将各成分溶于水,煮沸4~5min。最终pH7.5±0.2。冷至55~60°C,倾注平板。
A3 MUCAP试剂
按生产者提供的使用说明制备工作稀释液,贮于4°C冰箱备用。
A4 氧化酶试纸
氧化酶试液:
甲液:1%α-萘酚乙醇液;
乙液:1%二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。
氧化酶试纸:
将甲液与乙液等量混合。取定性滤纸,浸透混合液后,于70~80°C烘箱烘干。剪成
适当大小的纸条,密封于塑料袋或瓶中,贮于4°C冰箱备用。

━━━━━━━━

附加说明:
本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。
本标准由中华人民共和国内蒙古进出口商品检验局起草。
本标准主要起草人甄宏太、杨素贤、刘中学、苏庆、周云霞。
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中华人民共和国国家进出口商品检验局1994-12-26批准 1995-05-01实施

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