1 动物实验

1.1 实验原理

实验动物超负荷哺乳或造缺乳模型后，给予保健食品，观察其泌乳情况及仔鼠生长发育情况，以评价该产品的促进泌乳功能作用。

1.2 实验动物

小鼠及大鼠均可。选用3日内产仔的第二胎母鼠及其仔鼠，每窝仔鼠数目应相同。

1.3 剂量分组及受试样品给予时间 

实验设三个剂量组和一个空白对照组，以人体推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。受试样品给予时间15天，必要时可延长至30天。

1.4 实验设计

实验可选超负荷哺乳或缺乳模型任一种，受试样品应经口给予，推荐优先使用饮水或加入饲料的方式。实验结束期限为仔鼠断乳(出生21天左右)。

1.5 观察指标

母鼠体重

仔鼠体重

每周称仔鼠体重一次，直至实验结束。

1.6 数据处理和结果判定

一般采用方差分析，但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值< F0.05,结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05,P≤0.05,用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。

结果判定：实验组任一时间点的仔鼠体重增加，与对照组比较差异有显著性,可判定该受试样品促进泌乳功能作用动物实验结果阳性。

 

2 人体试食试验

2.1受试人群选择

2.1.1 受试者纳入标准

乳母年龄<35岁，乳量不足，婴儿吃不饱，母子身体均健康的志愿受试者。

2.1.2 排除受试者标准

2.1.2.1乳母乳房发育不正常，有乳腺疾病者。

2.1.2.2 有影响催乳素水平各种因素者。

2.1.2.3 哺乳期再次妊娠者。

2.1.2.4 有不良嗜好(抽烟、喝酒)，服用其它有促泌乳药物者。

2.1.2.5 有产后大出血者。

2.1.2.6 对本受试样品过敏者。

2.1.2.7 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。

2.2 试验设计及分组要求：采用自身及组间对照试验设计。按受试者的泌乳情况随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如乳母年龄、婴儿出生天数、饮食情况、家庭经济状况等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。

2.3 受试样品的剂量和使用方法：试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可服用安慰剂或采用阴性对照，也可服用具有同样作用的阳性物。受试样品给予时间7天，必要时可延长至15天。

2.4 观察指标

2.4.1 安全性指标

2.4.1.1 一般状况  包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等

2.4.1.2 血、尿、便常规检查（仅在试验开始时检查一次）

2.4.1.3 肝、肾功能检查（仅在试验开始时检查一次）

2.4.1.4 心电图、腹部B超检查（仅在试验开始时检查一次）

2.4.2 功效观察

乳母情况：乳房胀度、泌乳量、乳汁蛋白含量

2.4.3 功效判定标准

2.4.3.1乳房胀度判断标准

       A 乳房胀满、触之疼痛、有溢奶现象或手挤有奶喷出  2分

       B 乳房微胀、触之微痛、无溢奶现象但手挤有奶喷出  1分

       C 乳房不胀、触之不痛、手挤无奶或滴状奶          0分

累计服用受试样品期间(7－15天)的积分。

有效：试食组与对照组的积分比较，差异有显著性。

2.4.3.2泌乳量

       比较试食组和对照组的泌乳量增加值

       测定方法：于婴儿上次哺乳后2小时,将乳汁全部挤出，测定泌乳量。

该指标分别于试验开始时和试验结束时测定一次。计算其试食期间泌乳量的增加值或直接比较泌乳量的差别。

2.4.3.3 乳汁蛋白含量

        参见GB 5009.5-85

2.5 数据统计处理和结果判定

试验数据为计量资料，可用t检验进行分析。两组均数比较采用成组t检验，需进行方差齐性检验，对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态方差齐后，用转换的数据进行t检验；若转换数据仍不能满足正态或方差齐的要求，改用t’检验或秩和检验；但变异系数太大（如CV>50％）的资料应用秩和检验。

 

结果判定

试食组乳房胀度、泌乳量二项指标自身前后比较及与对照组比较差别有显著性，乳汁蛋白含量不低于对照组，可判定该受试样品具有促进泌乳功能作用。